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塑料培養(yǎng)皿的使用范圍
1.在無菌但空的塑料培養(yǎng)皿的底部邊緣(而不是蓋子)的邊緣貼上標(biāo)簽,至少要標(biāo)上您的姓名,日期,生長(zhǎng)培養(yǎng)基的類型以及要添加到融化的瓊脂培養(yǎng)基中的生物的類型。如果進(jìn)行平板連續(xù)稀釋或一系列重復(fù)稀釋,則應(yīng)包括稀釋因子,這會(huì)導(dǎo)致樣品中細(xì)胞濃度的系統(tǒng)降低。如果樣品中的細(xì)胞數(shù)量超過瓊脂平板的容量,則必須準(zhǔn)備系列稀釋液,在統(tǒng)計(jì)學(xué)上重要的范圍是30到300cfu。如果板上有超過300 cfu,則菌落將變得擁擠和重疊。
2.獲得一個(gè)裝有18 ml融化瓊脂培養(yǎng)基的試管。
瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)分配到試管中,并在高壓滅菌器中進(jìn)行預(yù)滅菌。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的同一天,瓊脂應(yīng)在蒸鍋中融化30分鐘,然后轉(zhuǎn)移到55°C水浴中。由于不能重復(fù)使用,只能融化實(shí)驗(yàn)所需的瓊脂。倒板前十分鐘,應(yīng)將融化的瓊脂管從55°C水浴中轉(zhuǎn)移到設(shè)置在48°C的實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)上的加熱塊中。瓊脂達(dá)到此溫度后,即可倒出。如果瓊脂太熱,則樣品中的細(xì)菌可能會(huì)被殺死。如果瓊脂過冷,則一旦固化,培養(yǎng)基可能會(huì)結(jié)塊。
3. 獲取您的樣品,它應(yīng)該是通過將菌落中的細(xì)胞混合到緩沖液或鹽水中而產(chǎn)生的細(xì)胞懸浮液。樣品可以源自單個(gè)樣品的稀釋系列。要鍍的樣品量應(yīng)在0.1到1.0毫升之間。
4. 打開空的陪替氏塑料培養(yǎng)皿的蓋子,然后將樣品分配到板的中間。關(guān)上蓋子。在整個(gè)過程中使用無菌技術(shù)。使用血清移液器或微量移液器將樣品轉(zhuǎn)移到板上??刂茦悠返牧髁?,使其不會(huì)濺出板。
5.從融化的瓊脂管上取下蓋子,并使開口管的邊緣穿過本生燈的火焰。
6.打開裝有樣品的培養(yǎng)皿的蓋子,然后將瓊脂小心倒入。蓋上蓋子,然后通過輕輕旋轉(zhuǎn)平板將樣品與瓊脂混合。
7.倒置塑料培養(yǎng)皿之前,讓瓊脂徹底固化。